Macarius war Bischof von Jerusalem in einer entscheidenden Epoche der Kirchengeschichte. Er nahm am Konzil von Nicäa im Jahr 325 teil und gehörte zu den entschiedenen Gegnern des Arianismus. Auf Bitten von Kaiser Konstantin leitete er die Ausgrabungen auf dem Kalvarienberg, bei denen der Überlieferung nach das Heilige Kreuz gefunden wurde. Unter seiner Leitung wurde die Grabeskirche in Jerusalem erbaut, die bis heute das wichtigste Heiligtum der Christenheit ist.